Uji Metabolisme Bakteri

Tujuan:
Untuk mengetahui kemampuan menghidrolisis amilum
Untuk mengetahui kemampuan menghidrolisis protein
Untuk mengetahui kemampuan menghidrolisis
Dasar Teori
Dalam kehidupan, mahluk hidup memerlukan energy yang diperoleh dari proses metabolisme. Metabolisme terjadi pada semua mahluk hidup termasuk kehidupan mikroba. Pada hewan atau tumbuhan yang berderajat tinggi enzim yang di sediakan untuk keperluan metabolisme reatif stabil, selama terjadi perkembangan individu memang terjadi perubahan susunan enzim, akan tetapi pada pergantian lingkungan perubahan itu sangat kecil.
Metabolisme merupakan serentetan reaksi kimia yang terjadi dalam sel hidup (Bibiana W. Lay, 1992 dalam Darkuni, 2001). Dalam metabolisme ada dua fase yaitu katabolisme dan anabolisme. Metabolime ini selalu terjadi dalam sel hidup karena di dalam sel hidup terdapat enzim yang diperlukan untuk membantu berbagai reaksi kimia yang terjadi. Suatu proses reaksi kimia yang terjadi dapat menghasilkan energi dan dapat pula memerlukan energi untuk membantu terjadinya reaksi tersebut. Menurut Darkuni (2001) bila dalam suatu reaksi menghasilkan energi maka disebut reaksi eksergonik, dan apabila untuk dapat berlangsungnya suatu reaksi diperlukan energi, reaksi ini disebut reaksi endergonik
Kegiatan metabolisme meliputi proses perubahan yang dilakukan untuk sederetan reaksi enzim yang berurutan. Secara singkat kegiatan proses ini disebut tansformasi zat. Hasil kegiatan ini akan dihasilkan nutrien sederhana seperti glukosa, asam lemak berantai panjang atau senyawa-senyawa aromatik yang dapat digunakan sebagai bahan untuk proses neosintetik bahan sel.
Menurut Anonimous (2008) enzim sangat di pengaruhioleh beberapa hal yaitu:
konsentrasi enzim
konsentrasi substrat
pH
suhu
setiap enzim berfungsi optimal pada pH dan temperatur tertentu. Suhu yang sangat rendah dapat menghentikan aktivitas enzim tetapi tidak menghancurkannya. Aktivitas enzim diatur melalui 2 cara:
pengendalian katalis secara langsung
pengendalian genetik
Proses metabolisme akan menghasilkan hasil metabolisme yang berfungsi
menghasilkan sub satuan makromolekul dari hasil metabolisme yang bergun sebagai penyediaan tahap awal bagi komponen-komponen sel
menghasilkan dan menyediakan energi yang dihasilkan dari ATP lewat ADP dengan fosfat. Energi ini sangat penting untuk kegiatan proses lain yang dalam prosesnya hanya bisa berlagsung kalau tersedia energi.
Bentuk-Bentuk Metabolisme Pada Mikroba
Fotosintesis
Fotosintesis adalah proses penyusunan atau pembentukan dengan menggunakan energi cahaya atau foton. Sumber energi cahaya alami adalah matahari yang memiliki spektrum cahaya infra merah (tidak kelihatan), merah, jingga, kuning, hijau, biru, nila, ungu dan ultra ungu (tidak kelihatan) (Anonim, 2000). Kebanyakan bacteria tidak mempunyai klorofil, namun ada juga beberapa spesies yang mempunyai pigmen fotosintesis yang dinamakan bakterioklorofil. Fotosintesis bakteri terjadi dengan cara yang sama seperti pada tumbuhan hijau, kecuali bahwa bakteri tidak mempunyai fotosistem II untuk fotolisis air. Sehinggga air tidak pernah merupakan sumber reduktan dan oksigen tidak pernah terbentuk sebagai produk.
Persamaan reaksi fotosintesis pada bakteri adalah sebagai berikut:
n CO2 + 2n H2A (CH2O)n + n H2O + 2n A
dimana:H2A= hydrogen donor (dapat berupa H2S atau asam-asam organic)
H2A dalam persamaan reaksi di atas dapat berupa substrat organika atau anorganik sebagai penmgganti H2O.
Menurut Volk&Wheeler (1993) berdasarkan pigmen dan tipe reduktan yang digunakan dalam fotosintesis (diwakili H2A) bakteri fotosintetik diklasifikasi menjadi tiga suku:
Chlorobiaceae
Bakteri ini di sebut juga sebagai bakteri bakteri belerang hijau. Organisme ini menggunakan beberapa senyawa yang mengandung belerang maupun gas hidrogen sebagai reduktan fotosintesis. Rumus khas unutk fotosintesis bakteri belerang hijau adalah salah satu diantara yang berikut tergantung pada reduktan yang tersedia (CH2O mewakili karbohidrat yang disintesis)
CO2 + 2H2S cahaya (CH2O) + H2O + 2S
3CO2 + 2S + 5H2O cahaya 3(CH2O)
2CO2 + Na2S2O3 + 3H2O cahaya 2(CH2O) + Na2SO4 + H2SO4
CO2 + 2H2O cahaya (CH2) + H2O
Chromaticeae
Bakteri ini di sebut juga bakteri belerang ungu yang berbeda dengan bakteri belerang hijau terutama karena bakteri ini mengandung sejumlah pigmen karotenoid merah dan ungu dalam selnya. Bakteri ini menggunakan reduktan fotosintesis yang sama dengan yang digunakan bakteri belerang hijau, sehingga bakteri belerang ungu dapat melakukan reaksi-reaksi yang sama dengan bakteri belerang hijau.
Rhodospirillaceae
Bakteri ini di sebut juga sebagai bakteri ungu non belerang. Secara morfologi bakteri ini memiliki kesamaan dengan Chromaticeae tetapi tidak mampu menggunakan senyawa belerang sebagai reduktan fotosintesis. Dua marga suku ini yang paling banyak dipelajari adalah Rhodospirillum dan Rhodopseudomonas. Organisme ini dapat menggunakan hidrogen atau berbagai senyawa organik sebagai reduktan. Berikut adalah salah satu contohnya:
CO2 + 2CH3CHOHCH3 cahaya (CH2O) + H2O + 2CH3COCH3
Satu sifat penting fotosintesis bakteri yang tidak dapat di jumpai pada fotosintesis tumbuhan hijau adalah bahwa fotosintesis bakteri hanya dapat berlangsung dalam keadaan sama sekali tanpa oksigen. Namun beberapa anggota suku Rhodospirillaceae dapat tumbuh tanpa fotosintesis dalam keadaan ada oksigen jika di beri medium yang cukup subur untuk tumbuhnya. Klorofil bakteri sedikit berbeda dengan klorofil tumbuhan hijau , cahaya dengan gelombang yang lebih panjang diserap oleh bakteri daripada tumbuhan hijau.
Fotolitotrof
Jasad-jasad yang menggunakan zat-zat anorganik sebagai donor electron seperti H2, NH3, atau S dinamakan jasad litotrof. Jasad fotolitotrof hanya tergantung pada cahaya matahari dan senyawa anorganik sebagai donor electron untuk pertumbuhannya. Pada bakteri fotolitotrof sumber hidrogennya bukanlah air, dan oksigen tidak pernah dihasilkan dalamproses fotosintesis (Tarigan, 1988). Pola reaksi fotosintesisnya dapat dituliskan sebagai berikut:
n CO2 + n H2S ----------------- > (CH2O) n + n H2O + 2 n S
Dalam sintesis ini O2 tidak dihasilkan, akan tetapi sulfur (S) tersimpan daalm sel untuk kemudian dikeluarkan dan H2S meruapakan donor hydrogen..
Kemolitotrof
Sumber energi jasad-jasad yang masuk dalam golongan kemolitotrof tergantung kepada hasil-hasil oksidasi reduksi, dan dapat menggunakan senyawa-senyawa anorganik sebagai donor electron untuk pertumbuhannya.
Fotoorganotrof
Jasad-jasad yang termasuk fotorganotrof hanya tergantung kepada energi sinar matahari dengan menggunakan senyawa-senyawa organic sebagai donor electron untuk pertumbuhannya. Bakteri belerang mengabsorb bahan-bahan organic dari lingkungan hidupnya sebagai sumber hydrogen, tetapi metabolit ini tidak dapat digunakan langsung sebagai nutrient. H2 yang diperoleh akan berswenyawa dengna CO2 sehingga dihasilkan karbohidrat.
Kemoorganotrof
Jasad-jasad yang termasuk kemoorganotrof ini hidupnya tergantung kepada hasil-hasil oksidasi- reduksi dan senyawa organic sebagai donor electron untuk pertumbuhannya. Tipe nutrisi pada golongan ini berbeda dengan tipe nutrisi golongan lain, karena nutrisi pada jasad yang termasuk golongan kemoorganotrof dapat berlangsung dalam suasana gelap tetapi harus ada oksigen. Dalam hal ini bahan mentah organic diabsorbsi secara langsung dan digunakan sebagai nutrient.
Table Penggolongan mikroorganisme berdasarkan sumber energi dan sumber makanan yang diperlukan untuk pertumbuhan.
Sumber energi
Sumber makanan
Tipe kehidupan
Cahaya
Diperoleh dari senyawa anorganik
Diserap dari senyawa orgnaik
Fotolitotrof
Contoh:
Bakteri belerang
Bakteri belerang hijau
Alga biru
metafita
Fotoorganotrof
Contoh:
Bakteri ungu
fotosintetik
Senyawa kimia
Kemolitotrof
Contoh:
Bakteri belerang
Bakteri besi
Bakteri hydrogen
Kemoorganotrof
Contoh:
Bakteri saprofit
Bakteri pembusuk
Bakteri nitrat
Fungi
protozoa
kemosintetik
Autotrof
heterotrof
Sumber: Tarigan, Jeneng. 1988. Pengantar Bioteknologi. Malang: IKIP Malang
Proses Pembentukan ATP
Pembentukan ATP (Adenosin triphosphat) adalah proses dihasilkan energi. Energi yang dihasilkan dalam bentuk ATP. Untuk membentuk ATP ini diperlukan energi sebanyak 7-8 Kcal dan penambahan fosfat. Karena itu pembentukkan fosfat. Karena itu pembentukkan ATP ini disebut juga dengan nama fosforilasi. Pola umum pembentukkan ATP digambarkan sebagai berikut:
ADP + Pi ATP
7-8 Kcaldari
Proses fosforilasi ADP (Adenosin difosfat) dapat terjadi melalui:
fosforilasi fotosintetik, dilakukan oleh mikroba yang dapat melakukan proses fotosintetik
fosforilasi substrat, dilakukan oleh mikroba yang tidak mempunyai kemampuan untuk melakukan fotosintetik, sumber utama untuk memperoleh energi adalah dari substrat
fosforilasi oksidatif, dilakukan oleh mikroba yang tidak dapat melakukan fotosintesis serta tidak memerlukan substrat sebagia sumber untuk mendapatkan energi. Energi ini diperoleh untuk secara oksidasi.
Fosforilasi dilakukan untuk memperoleh ATP karena itu perlu adanya suatu senyawa yang berikatan tinggi dan diperoleh dari hasil aktivasi susbstrat. Aktivasi ini dibantu oleh adanya enzim yaitu enzim NAD dan FAD.
Siklus Krebs
Katabolisme sempurna untuk senyawa glukosa sehingga akan dihasilkan CO2 dan H2O terjadi dalam 3 tahap, yaitu glikolisis, siklus kreb, dan pengangkutan elektron atau elektron trsnsport sistem (ETS).
Dari jalur penguarian glukosa akan dihasilkan asam piruvat yang selanjutnya akan dioksidasikan melalui jalur siklus kreb atau siklus TCA (trikarbiksilad acid = asam trikarboksilat). Juga dikenal dengan nama lain yaitu siklus asam sitrat karena rentetan siklus ini dimulai dari asam sitrat. Siklus kreb ini sebenarntya merupakan jalan utama pada usaha pembangkitan ATP pada golongan mikroba atau bakteroi aerobik, yaitu yang melalui fosforilasi oksidasi. Bila ada oksigen maka energi dari asam piruvat ini akan diubah melalui respirasi anaerobik. Proses ini akan menyebabkan hilangnya 1 molekul karbon dan terbentuknya CO2 serta enzim NADH.
Dalam siklus kreb, asam sitrat (6C) akan diubah menjadi asam oksaluasetat dengan karbon menjadi 4 (4C). Proses ini dilakukan dnegan reaksi oksidasi dan dekarboksilasi.
Sistem pengankutan elektron juga merupakan rantai respirasi, suatu jalur penggunaan elektron yang dihsilak oleh metabolisme terutama oleh metabolisme aerobik. Ada juga beberapa reaksi yang digunakan oleh bakteri anaerobik.
NADH dan FADH2 yang dihasilkan oleh respirasi aerobik tersebut dan juga oleh siklus kreb diangkut dan dipindahkan kemolekul pengangkut (carrier molekul) yang terdapat pda lipida membran. Molekul pengangkut ini terdiri protein dan non protein. Bagian protein berupa flavoprotein dan sitokrom. Sedangkan bagian non protein berupa quinone dalam bentuk koenzim Q.
Rantai pengangukutan ini dimulai oleh oksidasi NADH dan diikuti oleh reduksi FAD sehingga akan dihasilkan FADH dan ATP. Pembentukan ATP dilakukan dengan fosforilasi oksidatif. Pada akhir rentetat reaksi dari rantai ini elekron alkan berekasi dengan oksigen sebagai aseptor elektron dengan bantuan enzim sitokrom oksidase. Oksigen akan bereaksi dengan ion hidrogen dan membentuk air.
Rentetan reaksi dalam sistem ini dapat digambarkan sebagai suatu rantai yang pada masing-masing mata rantai akan dilewati elektron. Pada setiap mata rantai, pada reaksi tertentu akan dilepaskan energi sehingga energi ini dapat digunakan untuk menghasilkan ATP. Sistem pengangkutan elektron ini berlangsung dalam membran sel prokariot. Bagan siklus krebs yang memperlihatkan proses pembentukan ATP dan pengeluaran ATP untuk kegiatan proses lainnya dapat dilihat pada proses berikut:
DATA HASIL PENGAMATAN
Medium
Spesies Bakteri
Hasil Pengamatan
SMA
Escherichia coli
++
Bacillus subtilis
+++
Staphylococcus aureus
++
NAL
Escherichia coli
+
Bacillus subtilis
++
Staphylococcus aureus
+++
AA
Escherichia coli
+++
Bacillus subtilis
+
Staphylococcus aureus
++
Keterangan:
+++ = kemampuan menghidrolisa tinggi
++ = kemampuan menghidrolisa sedang
+ = kemampuan menghidrolisa rendah
- = tidak menghirolisis
ANALISIS DATA
Uji Adanya Kemampuan Menghidrolisis Amilum
Pada uji adanya kemampuan menghidrolisis amilum, diperoleh data bahwa bakteri Escherichia coli memiliki kemampuan menghidrolisis amilum tinggi. Hal ini terlihat dengan adanya warna jernih di sekitar goresan bakteri dan warna jernih tersebut lebih banyak dibandingkan dengan medium lainnya.
Hasil pengamatan pada bakteri Staphylococcus aureus memiliki kemampuan menghidrolisis amilum sedang. Hal tersebut dapat terlihat oleh adanya warna jernih di sekitar goresan bakteri.
Sedangkan pada bakteri Bacillus subtilis mempunyai kemampuan menghidrolisa rendah. Hasil tersebut dapat dilihat dari adanya sedikit warna jernih di sekitar goresan bakteri dan warna tersebut paling sedikit jika dibandingkan dengan medium lainnya.
Uji Adanya Kemampuan Menghidrolisis Protein
Berdasarkan data hasil pengamatan di atas, dapat diketahui bahwa pada uji adanya kemampuan menghidrolisis protein dengan medium SMA (Skim Milk Agar), bakteri Bacillus subtilis memiliki kemampuan menghidrolisa protein yang tinggi. Sedangkan bakteri E. coli dan S. aureus memiliki kemampuan menghidrolisa protein sedang. Adanya kemampuan menghidrolisis protein ini ditunjukkan dengan adanya warna jernih di sekitar goresan bakteri.
Uji Adanya Kemampuan Menghidrolisis Lemak
Dari hasil pengamatan pada uji adanya kemampuan menghidrolisis lemak ini, bakteri Escherichia coli mempunyai kemampuan menghidrolisis lemak yang rendah. Hal ini ditunjukkan dengan adanya sedikit warna yang lebih merah pada bagian bawah koloni bakteri pada dasar medium.
Pengamatan pada bakteri Bacillus subtilis diperoleh data bahwa bakteri tersebut memiliki kemampuan menghidrolisis lemak sedang. Hal tersebut terlihat dari adanya warna yang lebih merah pada bagian bawah koloni bakteri pada dasar medium.
Sedangkan berdasarkan hasil pengamatan, pada bakteri Staphylococcus aureus mempunyai kemampuan menghidrolisis lemak yang tinggi. Hal tersebut dirunjukkan dengan adanya warna yang lebih merah pada bagian bawah koloni bakteri pada bagian dasar medium.
PEMBAHASAN
Hidrolisis Amilum
Amilum merupakan karbohidrat yang masuk dalam jenis polisakarida. Polisakarida merupakan makromolekul, polimer dengan beberapa monosakarida yang dihubungkan dengan ikatan glikosidik. Benerapa polisakarida berfungsi sebagai materi simpanan atau cadangan yang nantinya ketika diperlukan akan dihidrolisis untuk menyediakan gula bagi sel (Campbell, 2002). Kemampuan untuk memanfaatkan gula atau unsur yang berhubungan dengan konfigurasi yang berbeda dari glukosa merupakan hasil kemampuan organisme untuk mengubah substrat menjadi perantara-perantara sebagai jalur untuk fermentasi glukosa (Kusnani, 2003).
Berdasarkan hasil pengamatan metabolisme bakteri, tampak bahwa semua bakteri, baik Escerichia coli, Bacillus subtilis, dan Streptococcus aureus mampu menghidrolisis amilum. Bukti bahwa kesemua bakteri tersebut mampu menghidrolisis amilum adalah adanya daerah jernih atau bening yang terdapat di sekitar koloni bakteri yang sedang tumbuh (hasil inokulasi). Kemampuan untuk menghidrolisis amilum menjadi glukosa, maltosa, dan dekstrin karena mempunyai enzim amilase.
Amilum tidak dapat langsung digunakan, sehingga bakteri harus menghidrolisis amilum terlebih dahulu menjadi molekul sederhana dan masuk ke dalam sel (Kaiser, 2005). Menurut Hadioetomo (1990), fungsi uji positif hidrolisis amilum pada bakteri ditandai dengan tampaknya area jernih di sekitar pertumbuhan bakteri yang digoreskan. Adanya daerah jernih tersebut disebabkan eksoenzim dan organisme menghidrolisis amilum dalam medium agar.
Menurut Schegel (1994), fungi atau bakteri memproduksi α-amilase sehingga mampu menguraikan amilum dengan eksoenzim amilolitik tersebut amat luas antara mikroorganisme, diantaranya bakteri Bacillus macerans, Bacillus polimexa, dan Bacillus subtilis. Pada hasil pengamatan diketahui bahwa Escerichia coli memiliki kemmapuan paling tinggi dalam menghidrolisis amilum karena daerah jernih yang ditunjukkan disekitar koloni Escerichia coli paling luas dibandingkan dengan bakteri yang lain. Bila ditinjau dari pendapat Schegel tersebut dimungkinkan jumlah sel Escerichia coli yang diinokulasikan pada medium lebih banyak jumlahnya. Sehingga jumlah sel yang melakukan metabolisme semakin banyak, dan daerah jernih yang ditunjukkan pun terlihat paling luas.
Pada uji adanya hidrolisis amilum digunakan larutan iodium pada tahap akhir. Iodium digunakan sebagai indikator adanya amilum, bila medium yang mengandung pati atau amilum diberi iodium maka akan nampak warna biru. Namun jika pati atau amilum tersebut telah terhidrolisis maka warnanya akan jernih atau bening. Warna jernih tersebut mengindikasikan bahwa pati atau amilum sudah terhidrolisis oleh eksoenzim pada bakteri (Hadioetomo, 1990). Menurut Kaiser (2005) warna jernih atau bening pada sekeliling bakteri setelah ditambahkan iodium disebabkan karena amilum tidak dapat bereaksi lama dengabn iodium. Pada ketigta bakteri yang diamati, kesemuanya mampu menghidrolisis amilum, hal ini menunjukkan bahwa bakteri-bakteri tersebut menghasilkan enzim α-amilase.
Hidrolisis Lemak
Berdasarkan hasil pengamatan dan analisis data ketiga bakteri Escerichia coli, Bacillus subtilis, dan Streptococcus aureus dapat menghidrolisis lemak, dan yang mempunyai kemampuan paling tinggi untuk menghidrolisis lemak adalah Streptococcus aureus. Hal ini terlihat dari intensitas yang ditunjukkan dalam warna merah yang terdapat di bawah pertumbuhan bakteri Streptococcus aureus. Hal ini menunjukkan bahwa jumlah enzim lipase yang dihasilkan oleh bakteri ini paling besar jika dibandingkan dengan bakteri lainnya. Kemampuan enzim lipase dalam memecahkan molekul lemak menjadi asam lemak dan gliserol paling besar.
Tempat hidup Streptococcus aureus yang biasanya tinggal pada wajah dan umumnya menimbulkan jerawat bagi pasiennya merupakan bukti pendukung bahwa Streptococcus aureus optimum dalam menghidrolisis lemak sebagai sumber energi untuk pertumbuhan dan perkembangan sel.
Menurut Gaman, dkk (1981) lemak merupakan campuran trigleserida yang terdiri atas 1 molekul gliserol yang berikatan dengan 3 molekul asam lemak. Lemak memiliki sifat antara lain: tidak larut dalam air, bila dipanaskan akan terjadi perubahan pada titik cair, titik asap dan titik nyala, serta plastis dan bentuknya mudah berubah-ubah bila mendapat tekanan, bisa mengalami nketengikan, dan reaksi dengan alkali aakan membentuk sabun dan gliserol. Enzim lipase mampu menghidrolisis lemak dan memecahkan menjadi 3 molekul asam lemak dan 1 molekul gliserol, reaksi kimia yang menunjukkan hidrolisis tersebut adalah sebagai berikut:
Hidrolisis Protein
Berdasarkan hasil pengamatan dan analisis data pada medium lempeng Skim Milk Agar (SMA) yang digunakan untuk menidentifikasi bakteri yang dapat menghidrolisa kasein, ketiga jenis bakteri (Escerichia coli, Bacillus subtilis, dan Streptococcus aureus) tersebut dapat menghidrolisis protein. Kemampuan bakteri dalam menghidrolisis protein ditunjukkan dengan terbentuknya daerah bening/jernih di sekitar goresan (tempat pertumbuhan bakteri yang diinokulasikan). Hal ini sesuai dengan pendapat Hadioetomo (1990) yang menyatakan bahwa uji positif ditandai dengan tampaknya area jernih di sekitar pertumbuhan organisme yang digoreskan.
Dari ketiga bakteri (Escerichia coli, Bacillus subtilis, dan Streptococcus aureus) tersebut mempunyai kemampuan menghidrolisis yang berbeda-beda sebagaimana disebutkan pada data hasil pengamatan, dari data hasil pengamatan secara berurutan berdasarkan kemampuannya dalam menghidrolisis protein dari yang paling tinggi sampai yang paling rendah adalah Bacillus subtilis, Escerichia coli, dan Streptococcus aureus. Perbedaan kemampuan dalam memghidrolisis protein dimungkinkan disebabkan karena prosuksi eksoenzim yang berupa enzim protease yang berbeda. Dimungkinkan Bacillus subtilis memiliki kemampuan menghasilkan protease lebih banyak dibandingkan Escerichia coli, dan Streptococcus aureus.
Adapun kemungkinan lain dari perbedaan kemampuan menghidrolisis protein adalah jumlah sel bakteri dari tiap jenis yang diinokulasikan pada medium tidak sama sehingga mempengaruhi hasil hidrolisis protein tersebut yang ditandai dengan perbedaan jumlah koloni yang tumbuh pada medium. Perbedaan jumlah sel bakteri pada tiap jenis bakteri dapat memberikan pengaruh yang nyata. Semakin banyak jumlah sel bakteri, maka semakin banyak sel yang melakukan metabolisme, akibatnya semakin luas daerah jernih pada medium.
Hidrolisis protein terjadi karena adanya reaksi enzimatis. Bakteri yang mempunyai eksoenzim mampu menghidrolisis kasein, yang menyababkan suspensi (medium) akan menjadi daerah jernih di sekeliling pertumbuhan bakteripertumbuhan bakteri. Kaiser (2005) menyatakan bahwa jika bakteri yang mempunyai eksoenzim mampu menghidrolisis kasein, maka suspensi kan menjadi daerah jernih di sekeliling daerah pertumbuhan bakteri.
Protein merupakan senyawa penting dalam tubuh organisme hidup. Medium yang digunakan untuk mengetahui adanya hidrolisis protein adalah terbuat dari susu skim yang dicampur agar dan aquades, dimana di dalam susu skim tersebut terkandung kasein yang nantinya akan terhidrolisis menjadi peptida dan asam amino.
Bakteri melakukan hidrolisis berbagai protein menjadi asam amino tunggal dengan tujuan menggunakan asam amino tersebut untuk sintesis protein dan molekul seluler yang lain atau sebagai sumber energi (Kaiser, 2005). Dalam pengamatan kami, daerah jernih terbentuk di sekitar daerah pertumbuhan bakteri, hal ini disebabkan oleh kasein yang nampak putih dalam suspensi koloid (medium SMA) telah terhidrolisis menjadi peptida dan asam amino yang hasilnya berupa energi yang digunakan untuk metabolisme pertumbuhan dan perkembangan sel.
DISKUSI
Adakah perbedaan menghidrolisis amilum, protein dan lemak antara bakteri E. coli dan Basillus subtilis?
Jawab: ada perbedaan kemampuan menghidrolisis amilum, protein dan lemak antara bakteri E. coli dan Basillus subtilis. Pada bakteri B. subtilis mampu menghidrolisis lemak dan protein lebih tinggi daripada E. coli. Sedangkan kemampuan untuk menghidrolisis amilum E. coli lebih tinggi daripada B. subtilis.
Adakah perubahan yang terjadi pada medium setelah dilakukan pengujian adanya hidrolisis amilum, protein, dan lemak? Bila ada berikan penjelasan
Jawab: Ada, pada medium AA dan SMA ditunjukkan dengan warna jernih di sekitar goresan. Sedangkan pada medium NAL hidrolisis lemak ditunjukkan oleh koloni bakteri yang berwarna lebih merah daripada medium kontrol.
KESIMPULAN
Berdasarkan pembahasan dapat diambil beberapa kesimpulan yaitu:
Bakteri yang digunakan dalam praktikum ini ketiganya (B. subtilis, E. coli, dan S. aureus) memiliki kemampuan dalam menghidrolisis amilum. Akan tetapi ketiga bakteri tersebut mempunyai kemampuan menghidrolisis amilum yang berbeda. Bakteri E. coli memiliki kemampuan menghidrolisis amilum paling tinggi di antara yang lain.
Bakteri yang digunakan dalam praktikum ini ketiganya (B. subtilis, E. coli, dan S. aureus) memiliki kemampuan dalam menghidrolisis protein. Akan tetapi ketiga bakteri tersebut mempunyai kemampuan menghidrolisis protein yang berbeda. Bakteri B. subtilis memiliki kemampuan menghidrolisis protein paling tinggi di antara yang lain.
Bakteri yang digunakan dalam praktikum ini ketiganya (B. subtilis, E. coli, dan S. aureus) memiliki kemampuan dalam menghidrolisis lemak. Akan tetapi ketiga bakteri tersebut mempunyai kemampuan menghidrolisis lemak yang berbeda. Bakteri S. aureus memiliki kemampuan menghidrolisis lemak paling tinggi di antara yang lain.